Le métabolisme normal de la 1,25-dihydroxy-vitamine D passe par une hydroxylation supplémentaire en position 24 pour former la 1,24,25-trihydroxy-vitamine D. Quoique tous les métabolites de la vitamine D n'aient pas encore été identifiés, il semble que les enzymes hépatiques microsomiaux soient impliqués dans la biotransformation ultérieure des métabolites hydroxylés de la vitamine D. Les produits de la biotransformation sont excrétés principalement par les fèces, via la bile.
In normale omstandigheden ondergaat 1,25-dihydroxyvitamine D een bijkomende hydroxylatie in positie 24 met vorming van 1,24,25- trihydroxyvitamine D. Alhoewel al de metabolieten van vitamine D nog niet geïdentificeerd werden, wordt aangenomen dat de hepatische microsomiale enzymen bij de verdere biotransformatie van gehydroxyleerde metabolieten van vitamine D tussenkomen. De producten van biotransformatie worden voornamelijk in de feces via de gal uitgescheiden.